Electroforesi

L’objectiu de l’electroforesi és separar les diferents proteïnes del sèrum.

- A 15μl de les Fraccions F0 - F3 se li afegeix, en un eppendorf, un tampó de càrrega (x3): (Tris-HCl 0,125 M, pH 6,8; SDS 4%; glicerol 20%; 2-mercaptoetanol 10%; Bau de bromfenol 0,008%).

- Escalfar les mostres a 95ºC durant 3 minuts.

- Carregar en pouets 10μl de F 3 y 5 μl de l’estàndard de proteïnes.

- Córrer l’electroforesi en tampó Tris-HCl 0,024M, pH 8,8, glicina 0,192 M i SDS 0,1%, a una intensitat de corrent constant de 30 mA fins que el blau de bromfenol estigui aproximadament a 1mm de l’extrem inferior del gel.

- Desmuntar el gel i tenyir-lo amb metanol/acètic/aigua amb blau de Coomassie (1g/l).

- Destenyir el gel en metanol/aigua.

A partir de l’electroforesi ja es pot obtenir el proteïnograma.

En la següent fotografia podem veure un exemple d'escalfador de l'IJC.